南京中医药大学学报

作者：姚露, 魏盼, 王思齐, 袁为远, 王霄彤, 郑劼, 洪敏,

关键词：人支气管上皮细胞, 上皮间质转化, TGF-β1, 血清饥饿, 药对,

目的 体外诱导人支气管上皮细胞（16HBE）上皮间质转化（EMT）最适条件摸索以及探讨麻黄-甘草对EMT的影响。方法 以16HBE细胞株为研究对象，分别给予转化生长因子β1（TGF-β1）单一刺激以及血清饥饿联合刺激，运用Western blot法检测上皮及间质特征性蛋白的表达。运用免疫荧光检测E-Cadherin和N-Cadherin胞内表达分布情况。运用qPCR检测上皮及间质特征性基因的表达水平。血清饥饿联合TGF-β1刺激，给予麻黄-甘草药对干预，Western blot法检测上皮及间质特征性蛋白的表达水平。结果 TGF-β1可诱导16HBE细胞由结构规则、质密均匀的鹅卵石状向纺锤体状转化。TGF-β1单独刺激可诱导16HBE细胞N-Cadherin、α-SMA蛋白表达升高，对E-Cadherin、ZO-1蛋白表达未见明显影响。而当细胞密度为15%时，血清饥饿联合TGF-β1可诱导16HBE细胞N-Cadherin、α-SMA、Vimentin、Collagen Ⅰ蛋白、基因水平升高以及E-Cadherin、ZO-1蛋白、基因水平降低，并且E-Cadherin蛋白分布紊乱，上皮结构破坏。血清饥饿联合TGF-β1刺激，麻黄-甘草药对可抑制N-Cadherin、α-SMA的表达，并恢复E-Cadherin蛋白的表达，对ZO-1无明显影响。结论 血清饥饿联合TGF-β1能体外诱导16HBE细胞建立稳定可重复的EMT模型，可用于体外研究哮喘发生EMT相关机制。麻黄-甘草药对一定程度上可抑制16HBE细胞EMT过程。

来源：2019年第3期

《南京中医药大学学报》期刊编辑部

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