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国内刊号：32-1247/R
国际刊号：1672-0482
发布日期:
作者：张前程, 文红梅, 刘娜, 袁琪, 刘睿, 崔小兵, 李松, 陈盛君,
关键词：广地龙, DNA, 特异性引物, 鉴别, 混伪品,
目的 通过设计特异性引物来鉴定广地龙及其混伪品。方法 提取广地龙及其混伪品的DNA。利用通用引物COⅠ序列对广地龙及其混伪品进行PCR扩增，并对扩增产物进行双向测序。通过比对广地龙及其混伪品的COⅠ序列，找出广地龙的变异位点，设计出广地龙的特异性引物，用于广地龙及其混伪品的鉴定。对PCR反应条件退火温度、循环次数、DNA模板量和Taq酶用量进行适应性考察。结果 COⅠ序列不存在特异性，不同物种、不同品种的动物药均可扩增出750 bp大小的片段，无法鉴定广地龙及其混伪品。通过比对广地龙及其混伪品的COⅠ序列，设计出广地龙的特异性引物PA-f/PA-r。在建立的PCR反应体系中，只有广地龙可以获得574 bp的基因片段，其他混伪品未扩增出相应条带。结论 设计的广地龙特异性引物可以准确、成功鉴别广地龙，与其他混伪品区分，为广地龙的品种鉴别提供了有效的方法。
来源：2020年第3期
《南京中医药大学学报》期刊编辑部
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