南京中医药大学学报

作者：崔杰, 李梦雨, 刘雨彤, 毛洪运, 林紫微, 杨菲, 华永庆,

关键词：骨质疏松, 藁本内酯, 破骨细胞, G蛋白偶联雌激素受体,

目的  观察藁本内酯(LIG)对核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导RAW264.7向破骨细胞分化的影响，并探讨该作用与G蛋白偶联雌激素受体(GPER)的相关机制。方法  体外培养RAW264.7细胞，RANKL诱导破骨细胞分化，并用LIG进行干预。通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性检测和TRAP染色法评价破骨细胞形成和分化能力；qPCR法检测GPER及破骨细胞相关基因mRNA水平；Western blot法检测GPER蛋白表达；采用GPER特异性拮抗剂G36进行干预，观察LIG干预破骨细胞分化的作用变化。结果  LIG浓度为10 μmol/L时，TRAP活性检测结果显示，TRAP活性显著降低(P < 0.01)；TRAP染色结果显示，与RANKL组相比，LIG组TRAP阳性细胞形成减少(P < 0.001)；qPCR检测结果显示，与RANKL组相比，LIG组树突状细胞-特异性跨膜蛋白(DC-STAMP)、活化T细胞核因子(NFATc1)、组织蛋白酶K(CTSK)和核因子κB受体(RANK)的mRNA水平显著降低(P < 0.05, P < 0.001)，而GPER mRNA表达明显升高(P < 0.001)；Western blot结果显示，与RANKL组相比，LIG组GPER蛋白表达升高(P < 0.001)。与LIG组比较，LIG+G36组TRAP阳性细胞数升高(P < 0.01)，TRAP活性增强(P < 0.05)，DC-STAMP、NFATc1、CTSK、RANK mRNA的表达升高(P < 0.05)。结论  LIG能够抑制RANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化，其机制可能是促进GPER表达，减少RANK和下游转录因子NFATc1的表达，抑制破骨细胞分化和骨吸收功能。

来源：2021年第4期

《南京中医药大学学报》期刊编辑部

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