南京中医药大学学报

作者：刘梦秋, 曹程, 唐竹芊, 肖东, 朱梓强, 杨滨, 段金廒, 赵明, 朱悦,

关键词：麋鹿角, 氧化应激, 抑郁症, 细胞凋亡, 功效物质,

  目的  基于慢性不可预见性动物应激(CUMS)模型考察麋鹿角各提取物的抗抑郁效用, 以及其对氧化损伤诱导神经元凋亡的抑制效应, 并对产生该效应的功效物质进行筛选研究。  方法  制备麋鹿角各提取物, 采用小鼠CUMS模型, 通过糖水偏嗜实验、悬尾实验和强迫游泳实验评价麋鹿角提取物的抗抑郁功效。采用TUNEL法检测小鼠海马区细胞凋亡情况, 采用相应试剂盒测定小鼠血清中丙二醛(MDA)的含量，过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽还原酶(GSH)的活性。采用小鼠海马神经元细胞系HT22和大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞系PC12, 以过氧化氢(H2O2)作为造模剂构建氧化损伤模型, 通过MTT法评价麋鹿角提取物对细胞氧化损伤的保护作用。采用TUNEL染色法考察麋鹿角水提取物(EDC-WE)对H2O2诱导HT22细胞凋亡的抑制作用, 进一步采用Western blot法考察神经元细胞凋亡通路相关蛋白Caspase3、Cleaved-Caspase3、Caspase9、Cleaved-Caspase9的表达水平。将EDC-WE采用超滤法分离为分子量>100 kD、分子量30~100 kD、分子量10~30 kD、分子量 < 10 kD的4个组分, 通过MTT法评价EDC-WE不同分子量段对HT22细胞氧化损伤的保护作用, 并对分子量 < 10 kD的组分进行TUNEL染色分析和Caspase信号通路的考察验证。  结果  麋鹿角各提取物均能显著上调模型小鼠糖水偏嗜率, 缩短小鼠悬尾和强迫游泳不动时间, 在各提取物中以EDC-WE的效用最强。EDC-WE能够对抗HT22细胞的氧化损伤, 并调控Caspase信号通路对抗H2O2诱导的HT22细胞凋亡, 其中分子量 < 10 kD的麋鹿角水溶性物质抗细胞氧化损伤效用较强。  结论  EDC-WE可以抑制氧化应激诱导的神经元细胞凋亡, 从而实现抗抑郁作用, 其中分子量 < 10 kD的麋鹿角水溶性物质可能是关键的功效成分。

来源：2023年第3期

《南京中医药大学学报》期刊编辑部

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