南京中医药大学学报

作者：王晓戎, 黄禹舒, 陈仁杰, 陈欣德, 张田革, NISHIMWE Ange, 程峰, 吴志浩,

关键词：藤梨根乙醇提取物, 结直肠癌, 细胞凋亡, AKT, GSK-3β, NF-κB, PUMA,

  目的  研究藤梨根乙醇提取物(TLG)对结直肠癌细胞的作用及其抗肿瘤机制。  方法  利用MTT检测TLG对人结直肠腺癌细胞HCT-15、LoVo的毒性, 细胞平板克隆实验检测TLG对结直肠癌细胞HCT-15、LoVo增殖的影响, Hoechst-33258染色法和流式细胞术检测TLG对结直肠癌细胞凋亡的影响, Western blot实验检测TLG对HCT-15中相关蛋白Caspase-3、PARP、P65、PUMA、AKT、GSK-3β表达的影响, 双荧光素酶报告基因实验检测TLG对HCT-15中相关启动子活性的影响。  结果  结直肠癌细胞HCT-15、LoVo经TLG处理后, 与对照组相比, 细胞活力以时间及剂量依赖性下降(P < 0.01，P < 0.001), 转染AKT cDNA、PUMA siRNA或GSK-3β抑制剂处理后能够恢复增殖(P < 0.001);不同浓度TLG处理后, 细胞凋亡率提高(P < 0.01, P < 0.001), 转染AKT cDNA或GSK-3β抑制剂处理后能够遏制TLG诱导的凋亡(P < 0.01，P < 0.001);Western blot显示HCT-15细胞中的p-AKT/AKT、p-GSK-3β/GSK-3β蛋白表达量随TLG浓度上升而减少(P < 0.01), Cleaved-Caspase-3/Caspase-3、Cleaved-PARP/PARP、p65、PUMA蛋白表达量随TLG浓度上升而增加(P < 0.05, P < 0.01，P < 0.001), 同时转染AKT cDNA、PUMA siRNA或GSK-3β抑制剂处理后能够阻滞TLG对下游蛋白Cleaved-Caspase-3/Caspase-3、Cleaved-PARP/PARP、p65、PUMA的影响(P < 0.05, P < 0.01，P < 0.001);报告基因结果显示NF-κB、PUMA启动子活性随TLG浓度上升而增强(P < 0.05, P < 0.01), 同时转染AKT cDNA或GSK-3β抑制剂处理后恢复(P < 0.01, P < 0.001)。  结论  TLG可以显著诱导结直肠癌细胞凋亡, 发挥较强的抑制肿瘤作用, 其机制可能与AKT/PUMA信号通路有关。

来源：2023年第6期

《南京中医药大学学报》期刊编辑部

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