南京中医药大学学报

作者：盛钰翔, 蒋捷, 苑家福, 包小江, 郑正, 秦富豪, 唐一石, 江滨,

关键词：鸦胆子苦素A, 结肠癌, 增殖, 转移, Wnt/β-catenin,

目的探究鸦胆子苦素A(BA)对结肠癌的抑制作用及机制。方法采用不同浓度BA(0、1、2、5、10、20、40、80 μmol·L-1)作用于人结肠癌HT-29和HCT116细胞，利用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力。通过流式细胞术、细胞划痕实验和Transwell实验，评估BA对细胞凋亡、细胞周期、侵袭和迁移能力的影响。采用分子对接模拟BA与GSK-3β蛋白的结合，并通过Western blot检测细胞周期、上皮间质转化(EMT)相关蛋白和Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达。建立HT-29细胞皮下移植瘤小鼠模型，成瘤后，将小鼠随机分为3组，即空白组，BA低、高剂量组(0.1、0.2 mg·kg-1)，每组6只，给药19 d后，处死小鼠，分离肿瘤组织。观察各组肿瘤体积随时间变化；采用Ki67免疫组化法观察各组肿瘤组织细胞增殖情况；Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达。结果与空白组相比，BA可显著抑制HT-29和HCT116细胞增殖，IC50值为10.80 μmol·L-1和17.96 μmol·L-1。流式细胞术结果显示，BA显著诱导HT-29细胞凋亡(P < 0.01，P < 0.001)，并阻滞细胞周期于S期，伴随周期相关蛋白CDK2和Cyclin A表达减少(P < 0.05，P < 0.01，P < 0.001)。BA抑制细胞迁移和侵袭能力(P < 0.05, P < 0.01，P < 0.001)，降低EMT相关蛋白Snail、Vimentin、N-Cadherin的表达(P < 0.01，P < 0.001)，并上调E-Cadherin蛋白表达。此外，BA抑制β-catenin和p-GSK3β蛋白的表达。Wnt激动剂LiCl可显著拮抗BA的抗结肠癌作用；Wnt抑制剂XAV939可增强BA的抗结肠癌作用。而体内实验中，与空白组相比，BA低、高剂量组肿瘤体积显著缩小(P < 0.05，P < 0.001)。免疫组化结果显示，与空白组相比，BA低、高剂量组肿瘤组织中Ki67表达显著降低(P < 0.001)。Western blot结果进一步证明BA在体内抑制Wnt/β-catenin信号通路。结论BA抑制结肠癌HT-29细胞活力、细胞侵袭和迁移，诱导细胞凋亡并引发细胞周期停滞，并且在体内能显著抑制HT-29细胞皮下移植瘤的生长，其作用与抑制Wnt/β-catenin信号通路正相关。

来源：2025年第2期

《南京中医药大学学报》期刊编辑部

查看南京中医药大学学报杂志2025年第2期