南京中医药大学学报

作者：赵雅, 冯萧, 张存钰, 陈悦, 马朝群,

关键词：疮灵液, 糖尿病足溃疡, Nrf2/SLC7A11/GPX4通路, 铁死亡,

目的基于核因子E2相关因子2(Nrf2)/溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)通路观察疮灵液对糖尿病足溃疡(DFU)模型小鼠的影响，并探讨其可能的作用机制。方法动物实验中，采用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病小鼠，构建足部全层皮肤缺损模型，分为空白组，模型组，阳性对照组(重组人表皮生长因子，rhEGF)及疮灵液低、高剂量组，每组10只，连续干预14 d。检测创面愈合率，ELISA法检测血清炎症因子(IL-6、TNF-α、IL-1β)水平，比色法检测创面组织中氧化应激指标(SOD、MDA、GSH)以及亚铁离子(Fe2+)含量；透射电镜观察线粒体超微结构；qPCR、Western blot检测创面组织Nrf2、SLC7A11、GPX4等mRNA及蛋白表达。细胞实验中，以高糖诱导人脐静脉内皮细胞HUVEC铁死亡模型，分为空白对照组、高糖组、疮灵液干预组及疮灵液联合通路抑制剂(ML385、Erastin、RSL3)组。CCK-8检测细胞存活率，FerroOrange检测Fe2+含量，DCFH-DA、C11-BODIPY 581/591探针检测细胞内ROS和脂质ROS含量，Western blot检测Nrf2/SLC7A11/GPX4等蛋白表达。结果动物实验表明，与模型组相比，疮灵液低、高剂量组创面愈合率显著提高(P < 0.01)；血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平显著下降(P < 0.01)；MDA含量显著降低(P < 0.01)，SOD活性、GSH含量显著恢复(P < 0.05)。比色法检测显示疮灵液低、高剂量组可显著降低DFU创面异常升高的Fe2+水平(P < 0.05，P < 0.001)；电镜显示疮灵液低、高剂量组线粒体嵴结构改善；qPCR显示，经高剂量疮灵液干预后上调Rno-Nfe2l2(Nrf2)、Rno-Slc7a11、Rno-Gpx4、Rno-Acsl4 mRNA表达水平并抑制Rno-Acsl4 mRNA表达水平(P < 0.001)；Western blot结果表明疮灵液上调DFU创面组织中Nrf2、SLC7A11、GPX4和FTH1的表达(P < 0.01)，同时降低ACSL4水平(P < 0.01)。细胞实验表明疮灵液干预使高糖诱导的HUVEC存活率提升(P < 0.001)，加入ML385、Erastin或RSL3后，疮灵液的保护作用被显著抑制(P < 0.01)；疮灵液干预使Fe2+含量显著降低(P < 0.001)，该作用被ML385、Erastin或RSL3逆转；ROS和脂质ROS含量也显著降低(P < 0.001)，而加入ML385、Erastin或RSL3后部分削弱疮灵液的抗氧化作用；Western blot结果表明，疮灵液显著上调Nrf2、SLC7A11、GPX4表达(P < 0.001)，并下调4-HNE、COX2表达(P < 0.01)，而ML385、Erastin或RSL3可逆转该保护作用。结论疮灵液通过激活Nrf2/SLC7A11/GPX4通路抑制铁死亡，减轻氧化损伤和炎症反应，进而促进DFU愈合，为DFU治疗提供了新的分子机制靶点。

来源：2025年第10期

《南京中医药大学学报》期刊编辑部

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